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抗體工程是指利用重組DNA和蛋白質(zhì)工程技術(shù),對(duì)抗體基因進(jìn)行加工改造和重新裝配,經(jīng)轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)?/span>受體細(xì)胞后,表達(dá)抗體分子,或用細(xì)胞融合、化學(xué)修飾等方法改造抗體分子的工程。
這些經(jīng)抗體工程手段改造的抗體分子是按人類設(shè)計(jì)所重新組裝的新型抗體分子,可保留(或增加)天然抗體的特異性和主要生物學(xué)活性,去除(或減少或替代)無關(guān)結(jié)構(gòu),因此比天然抗體更具有潛在的應(yīng)用前景。
21世紀(jì),生物技術(shù)將與信息技術(shù)一道為全球經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供強(qiáng)大的動(dòng)力,“成為全社會(huì)重要并可能改變未來工業(yè)和經(jīng)濟(jì)格局的技術(shù)”。抗體工程技術(shù)隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展而不斷完善,并且是生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的主力軍,尤其在生物技術(shù)制藥領(lǐng)域占有重要地位。至2000年底為止,在美國藥品市場上生物技術(shù)藥物有76種,其中抗體藥物有15種;正處于臨床研究階段的369種生物技術(shù)藥物中,抗體藥物有70種。我國自1986年實(shí)施“國家高技術(shù)研究與發(fā)展(863)計(jì)劃”以來,生物技術(shù)的研究和開發(fā)都取得了非常大的進(jìn)展,而抗體工程項(xiàng)目一直得到“863”計(jì)劃的重點(diǎn)支持,已經(jīng)具備了一定的科研基礎(chǔ)和出現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化的良好發(fā)展勢頭。 抗體工程發(fā)展歷程抗體作為疾病預(yù)防、診斷和治療的制劑已有上百年的發(fā)展歷史。早期制備抗體的方法是將某種天然抗原經(jīng)各種途徑免疫動(dòng)物,成熟的B細(xì)胞克隆受到抗原刺激后,將抗體分泌到血清和體液中。實(shí)際上血清中的抗體是多種單克隆抗體的混合物,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體是人類有目的利用抗體步。多克隆抗體的不均一性,限制了對(duì)抗體結(jié)構(gòu)和功能的進(jìn)一步研究和應(yīng)用。1975年Kohler和Milstein用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備出均一性的單克隆抗體。雜交瘤單克隆抗體又稱細(xì)胞工程抗體。雜交瘤技術(shù)的誕生被認(rèn)為是抗體工程發(fā)展的次質(zhì)的飛躍,也是現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展的一個(gè)里程碑。利用這種技術(shù)制備的單克隆抗體在疾病診斷、治療和科學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。這種單克隆抗體多是由鼠B細(xì)胞與鼠骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合形成的雜交瘤細(xì)胞分泌的,具有鼠源性,進(jìn)入人體會(huì)引起機(jī)體的排異反應(yīng);完整抗體分子的分子量較大,在體內(nèi)穿透血管的能力較差;生產(chǎn)成本太高,不適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。在80年代初,抗體基因結(jié)構(gòu)和功能的研究成果與重組DNA技術(shù)相結(jié)合,產(chǎn)生了基因工程抗體技術(shù)。基因工程抗體即將抗體的基因按不同需要進(jìn)行加工、改造和重新裝配,然后導(dǎo)入適當(dāng)?shù)?/span>受體細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)的抗體分子。
與單克隆抗體相比,基因工程抗體具有如下優(yōu)點(diǎn):
1.通過基因工程技術(shù)的改造,可以降低甚至消除人體對(duì)抗體的排斥反應(yīng);
2.基因工程抗體的分子量較小,可以部分降低抗體的鼠源性,更有利于穿透血管壁,進(jìn)入病灶的核心部位; 3.根據(jù)治療的需要,制備新型抗體;
4.可以采用原核細(xì)胞、真核細(xì)胞和植物等多種表達(dá)方式,大量表達(dá)抗體分子,大大降低生產(chǎn)成本。
? 鹽溶 | ? 鹽析 | ? 脫鹽 | ? 逆流分配 | ? 分級(jí)[分離] |
? 硫酸銨分級(jí) | ? 分級(jí)沉淀 | ? 透析 | ? 反向透析 | ? 平衡透析法 |
? 電透析 | ? 透析袋 | ? 透析液 | ? 反相滲透 | ? 過濾 |
? 微孔過濾 | ? 超濾 | ? 超濾濃縮 | ? 超濾膜 | ? 超濾器 |
? 中空纖維 | ? 膜片鉗 | ? 膜濾器 | ? 膜過濾 | ? 膜滲透壓計(jì) |
? 選擇通透膜 | ? 表觀相對(duì)分子量 | ? 截留分子量 | ? 超量原子百分?jǐn)?shù) | ? 生理鹽水 |
? 冷凍蝕刻 | ? 冷凍撕裂 | ? 凍融 | ? 弗氏細(xì)胞壓碎器 | ? 勻漿器 |
? 冷凍干燥 | ? 凍干儀 | ? 范斯萊克儀 | ? 漩渦振蕩器 | ? 瓦爾堡呼吸計(jì) |
? 瓦氏高速搗碎器 | ? 黏度計(jì) | ? 吸收池 | ? 比濁法 | ? 波-伊勻漿器 |
? 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 | ? 索氏提取器 | ? 同步加速器 | ? 合成儀 | ? 離心 |
? 離心速度 | ? 相對(duì)離心力 | ? 角轉(zhuǎn)頭 | ? 吊籃式轉(zhuǎn)頭 | ? 垂直轉(zhuǎn)頭 |
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