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對制備的McAb進行系統的鑒定是十分必要的，應做下述5個方面的鑒定。

1．抗體特異性的鑒定 除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應該用與其抗原成分相關的其他抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA法、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應外，還應該用其他臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應，以便挑選腫瘤特異性抗原或腫瘤相關抗原的單克隆抗體。②制備抗重組細胞因子的單克隆抗體應首先考慮是否與表達菌株的蛋白有交叉反應，其次是與其他細胞因子間有無交叉反應。

2．McAb的Ig類與亞類的鑒定 一般在用酶標或熒光素標記的第2抗體進行篩選時已經基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標記或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3％）更有利于沉淀線的形成。

3．McAb中和活性的鑒定 用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感動物或敏感細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。

4．McAb識別抗原表位的鑒定 用競爭結合實驗測相加指數的方法測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別表位是否相同。

5．McAb親和力的鑒定 用ELISA或RIA競爭結合實驗來確定McAb與相應抗原結合的親和力。