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流式細(xì)胞儀（flow cytometer，F(xiàn)CM）是進(jìn)行流式細(xì)胞分析的儀器，它集電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體理論、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)及單克隆抗體技術(shù)于一體，被譽(yù)為實(shí)驗(yàn)室的“CT”。

流式細(xì)胞術(shù)則是一種在功能水平上對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析和分選的檢測(cè)技術(shù)，它可以高速分析上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù)，具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)代的細(xì)胞定量分析技術(shù)。自1969年第1臺(tái)流式細(xì)胞儀問(wèn)世，流式細(xì)胞術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為日益完善的細(xì)胞分選和分析技術(shù)。

FCM儀器分為2大類(lèi)：一類(lèi)為臺(tái)式機(jī)，其特點(diǎn)為儀器光路調(diào)節(jié)系統(tǒng)固定，自動(dòng)化程度高；另一類(lèi)為大型機(jī)，其特點(diǎn)為可快速將所感興趣的細(xì)胞分選出來(lái)，并且可將單個(gè)或的細(xì)胞分選到特定的培養(yǎng)孔或培養(yǎng)板上，同時(shí)可選配多種波長(zhǎng)和類(lèi)型的激光頭，進(jìn)行更為廣泛的科學(xué)研究領(lǐng)域。

FCM的結(jié)構(gòu)一般可分為5部分：①流動(dòng)室及液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)；②激光光源及光速形成系統(tǒng)；③光學(xué)系統(tǒng)；④信號(hào)檢測(cè)與存儲(chǔ)、顯示、分析系統(tǒng)；⑤細(xì)胞分選系統(tǒng)。

流式細(xì)胞儀的工作原理 將待測(cè)細(xì)胞染色后，制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測(cè)樣品壓人流動(dòng)室，同時(shí)，不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管?chē)姵觯室汗苋丝诜较蚺c待測(cè)樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)域。

流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下，產(chǎn)生散射光信號(hào)和熒光信號(hào)。

1．散射光信號(hào)分為前向角散射光信號(hào)（FSC）和與激光束成90°收集的側(cè)向角—散射光信號(hào)（SSC）。FSC基本上反映細(xì)胞體積的大小，通常在FCM檢測(cè)作為閾值來(lái)排除樣品中的各種碎片及鞘液中的小顆粒；SSC主要反映細(xì)胞的顆粒特性，可以區(qū)分淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞及粒細(xì)胞。

2．熒光信號(hào)主要代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，熒光信號(hào)在被檢測(cè)前還需經(jīng)過(guò)一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個(gè)不同波長(zhǎng)的熒光信號(hào)。

上述信號(hào)同時(shí)被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收，并經(jīng)光電倍增管接收后轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過(guò)模／數(shù)轉(zhuǎn)換器，將連續(xù)的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識(shí)別的數(shù)字信號(hào)。計(jì)算機(jī)把所測(cè)量到的各種信號(hào)進(jìn)行計(jì)算機(jī)處理，將分析結(jié)果顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上。

FCM檢測(cè)數(shù)據(jù)的顯示，視測(cè)量參數(shù)的不同有多種形式可供選擇。單參數(shù)數(shù)據(jù)以直方圖的形式表達(dá)，其X軸為測(cè)量強(qiáng)度，Y軸為細(xì)胞數(shù)目。一般來(lái)說(shuō)，流式細(xì)胞儀坐標(biāo)軸的分辨率有512或1024通道數(shù)，視其模／數(shù)轉(zhuǎn)換器的分辨率而定。對(duì)于雙參數(shù)或多參數(shù)數(shù)據(jù)，既可以單獨(dú)顯示每個(gè)參數(shù)的直方圖，也可以選擇二維的三點(diǎn)圖、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖。