制藥網
技術文章
熒光抗體技術檢測新城疫
發布時間：2011-3-7本法是將一類熒光性染料結合于抗體免疫球蛋白上，成為熒光性染料標記抗體。當此標記抗體與相應的抗原相遇，可發生特異性結合，標記在抗體上的熒光染料也被帶到抗原—抗體復合物上。此復合物在紫外線照射下，被激發產生光亮的熒光（黃綠色、紅色或藍色），可在熒光顯微鏡下看到。以異硫氰酸鹽熒光素標記雞高免血清IgG抗體而進行病毒抗原檢測的一種方法，該方法簡便、快速、敏感、準確，適用于快速診斷。
作為熒光技術檢查的材料以脾臟為，也可采用肺和肝，按常規方法冷凍切片制成標本，然后將新城疫熒光抗體稀釋成一定工作濃度，滴加入經固定的切片標本上，在37~C染色30min，取出立即用PBS（pH 8．0）反復洗3次，然后滴加0．1％伊文思藍，作用2～3s后，再用PBS沖洗；然后用9：1緩沖甘油封固，鏡檢。在熒光顯微鏡見熒光者為雞新城疫病毒所在部位。
莊向生等以NDV單抗熒光抗體標記物為試劑，以直接熒光抗體試驗（DFA）對各種弱毒株疫苗接種，強毒株人工感染和野外病例雞組織器官切片的ND抗原進行檢測，結果表明DFA是一種快速簡便、直觀、準確的診斷方法，較適合于ND野外毒株的診斷。趙智博等應用免疫熒光試驗（1FA）對無特定病原（SPF）雞群的NDV抗體進行檢測，結果表明IFA可檢出NDV早期感染。