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技術文章

Dispase® II

發布時間:2017-8-9

產品描述

Dispase 中文名稱為中性蛋白酶,也稱為分散酶,是一種非特異性的金屬蛋白酶,被用來從各種不同組織或器官中消化細胞外基質,釋放并制備原代單細胞;或用于細胞培養中的細胞收獲或接種轉移;也被用于防止懸浮細胞培養時的細胞意外結團。

蛋白水解酶類,如胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都被用語來分散組織、分類細胞,但他們常傷害細胞,并且在培養時不穩定,甚至可能引入支原體污染。 Dispase 就沒有這個問題,不會給細胞膜帶來傷害,而且因為其來自細菌,故不會引入支原體或任何動物病毒;溫度、 pH 、血清成分等的差異對 Dispase 影響很小。 Dispase 經稀釋后其活性就大大降低,這也方便了后續的培養。 Dispase 甚至被加入細胞培養懸液中用于防止細胞團結。

 

勢:

該酶已被證實作用迅速有效又溫和;

細胞能保持完整,細胞膜無損;

該酶非哺乳動物來源,不含支原體或動物病毒污染;

對于溫度、 pH 的改變、以及血清成分都很穩定;

使用螯合劑或稀釋就能簡單滅活;

酶編號: EC 3.4.24.4

酶活定義:

1U 是在檢測條件下 1 分釋放相當于 1 umol 酪氨酸的 Folin 陽性氨基酸或肽的酶量; DispaseII  ≥0.8 U/mg (37oC ,使用酪蛋白作為底物, pH 7.5)  1U Dispase II 基本相當于 600U 日本單位的 Dispase 

抑制劑:  EDTA  EGTA  Hg2+ 、其他重金屬。血清不會抑制酶活性。

使用方法:

 Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl) 溶解 Dispase  10 mg/ml ,使用時用細胞培養液稀釋到 0.6-2.4 U/ml 。不推薦高于 2.4 U/ml    工作濃度,可用 0.22 um 的無菌濾膜過濾除菌。

保存于運輸說明:

保存在 +2 ° ~+8 °;配成溶液后,在 +2 ° ~+8 ° 2 周內使用有效,在 -20 ° 2 個月內使用有效;不要反復凍融;儲存液用 Hepes 鹽緩沖液稀釋后, +2 ° ~+8 °, 3 天內使用有效。

按照 Roche 提供的條件保存和運輸

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