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放線菌及霉菌形態觀察
發布時間：2010-3-1一、實驗原理
放線菌是指能形成分枝絲狀體或菌絲體的一類革蘭氏陽性細菌。常見放線菌大多能形成菌絲體，緊貼培養基表面或深入培養基內生長的叫基內菌絲（簡稱“基絲”），基絲生長到一定階段還能向空氣中生長出氣生菌絲（簡稱“氣絲”），并進一步分化產生孢子絲及孢子。有的放線菌只產生基絲而無氣絲。在顯微鏡下直接觀察時，氣絲在上層、基絲在下層，氣絲色暗，基絲較透明。孢子絲依種類的不同，有直、波曲、各種螺旋形或輪生。
霉菌可產生復合分枝的菌絲體，分基內菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態特征是識別不同種類霉菌的重要依據。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多，常是細菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。人們設計了各種培養和觀察方法，這些方法的主要目的是為了盡可能保持放線菌自然生長狀態下的形態特征。本實驗采用插片法。
插片法：將放線菌接種在瓊脂平板上，插上滅菌蓋玻片后培養，使放線菌菌絲沿著培養基表面與蓋玻片的交接處生長而附著在蓋玻上。觀察時，輕輕取出蓋玻片，置于載玻片上直接鏡檢。這種方法可觀察到放線菌自然生長狀態下的特征，而且便于觀察不同生長期的形態。
二、試劑與器材
1、材料 黑曲霉、青霉和根霉，細黃鏈霉菌或青色鏈霉菌，滅菌的高氏I號瓊脂和滅菌的查氏培養基。
2、實驗器材 經滅菌的：平皿、玻璃紙、無菌吸管、蓋玻片、玻璃涂棒，以及載玻片、接種環、接種鏟、鑷子、顯微鏡等。
三、實驗內容
倒平板→接種→插片→培養→鏡檢
四、關鍵步驟及注意事項
1、倒平板要厚一些，接種時劃線要密。
2、插片時要有一定角度并與劃線垂直。
3、觀察時，宜用略暗光線；先用低倍鏡找到適當視野，更換高倍鏡觀察。
4、如果用0、1%美藍對培養后的蓋玻片進行染色后觀察，效果會更好。