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高保真酶預(yù)混液在常溫放置會(huì)失效嗎
高保真酶預(yù)混液在常溫放置是否失效取決于以下關(guān)鍵因素:
1. 溫度與時(shí)間影響?
短期(如1晚)室溫存放可能導(dǎo)致活性降低,但通常不會(huì)失活。
長(zhǎng)期常溫儲(chǔ)存會(huì)顯著加速酶蛋白變性,導(dǎo)致催化能力下降或失效。
2. 產(chǎn)品穩(wěn)定性差異?
部分預(yù)混液含保護(hù)劑(如Hieff Canace®系列),可耐受短時(shí)凍融或室溫暴露。
不含穩(wěn)定劑的酶制劑對(duì)溫度更敏感,室溫存放風(fēng)險(xiǎn)較高。
3. 活性檢測(cè)建議?
若說明書未明確室溫穩(wěn)定性,建議通過陽性對(duì)照實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證活性。
電泳或功能測(cè)試(如PCR擴(kuò)增效率)可直觀評(píng)估是否失效。
4. 儲(chǔ)存規(guī)范?
常規(guī)要求2-8℃冷藏,避免反復(fù)凍融。
棕色避光瓶可減少光敏感成分降解。
高保真酶的正確儲(chǔ)存方法
1. 溫度要求?
短期保存(6個(gè)月內(nèi))?:建議-20℃避光儲(chǔ)存,避免反復(fù)凍融(需分裝使用)。
長(zhǎng)期保存(2年以上)?:-80℃可最大限度維持酶活性,溶解后需立即置于冰上操作。
臨時(shí)使用?:4℃冷藏可保存1周左右,但需避免多次溫度波動(dòng)。
2. 分裝與凍融?
分裝儲(chǔ)存?:按單次用量分裝至離心管,減少凍融次數(shù)(反復(fù)凍融易導(dǎo)致蛋白變性)。
溶解后處理?:若為液體酶,使用后剩余部分不可重新冷凍,需丟棄。
3. 包裝與避光?
避光措施?:使用棕色瓶或鋁箔包裹保存,防止光敏感成分降解。
干燥環(huán)境?:凍干粉比液態(tài)更穩(wěn)定,可置于干燥器內(nèi)冷藏以隔絕濕氣。
4. 特殊保護(hù)條件?
緩沖液適配?:部分高保真酶需特定pH緩沖液(如Tris-HCl)維持穩(wěn)定性。
抗氧化處理?:含巰基的酶建議添加DTT等保護(hù)劑,或在惰性氣體(如氮?dú)?中保存。
5. 運(yùn)輸條件?
低溫運(yùn)輸?:需干冰(-78℃)或冰袋(4℃)保溫,到貨后立即按規(guī)范儲(chǔ)存。
(注:具體耐受性需結(jié)合產(chǎn)品說明書及實(shí)際環(huán)境溫度判斷。)
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