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【微課堂】環氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數方法
發布時間：2024-8-27
環氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數—操作方法
取芽孢數在30cfu/mL-300cfu/mL的稀釋級別的試管（10-4）震蕩30s，每支稀釋管平行制備2個平皿，每皿加1mL菌懸液，注入15mL-20mL溫度不超過45℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養基（TSA）。等待瓊脂凝固后，倒置于30℃-35℃培養箱中培養48h-72h后計數。
總芽孢數cfu/片（支）=平均菌落數×稀釋倍數。
注意事項
1、切勿將生物指示劑進行紫外照射消毒，建議對初級包裝進行擦拭。
2、環氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數，建議使用含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水進行稀釋。
3、吸取含紙質載體的菌液時，避免纖維堵槍頭，導致移液不準確。
4、建議以單片（支）生物指示劑的形式進行計數，確保每片（支）生物指示劑計數結果均符合要求。
5、建議使用玻璃珠（4mm-6mm）對紙質載體進行打散處理。
6、芽孢計數過程中必須進行熱激活處理：溫度80℃-85℃，時間10min。