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一、原理
間接炭凝集反應(yīng)簡(jiǎn)稱炭凝。它是以炭粉微粒作為載體，將已知的抗體球蛋白吸附于這種載體上，形成炭粉抗體復(fù)合物，當(dāng)炭血清與相應(yīng)的抗原相遇時(shí)，二者發(fā)生特異性結(jié)合，形成肉眼可見(jiàn)的炭微粒凝集塊。
目前炭凝反應(yīng)已用于炭疽、鼠疫和馬副傷寒性流產(chǎn)等病的診斷。
二、材料與試劑
1、炭粉
炭粉粒子大小在0.12mm～0.15mm，目前市場(chǎng)上出售的炭粉均不合要求，必須過(guò)300目/寸的標(biāo)準(zhǔn)篩以300r/min離心去沉淀，再以 3 000r/min離心去上清，收集沉淀物；
2、高免血清；
3、待測(cè)標(biāo)本；
4、滅活兔血清；
5、正常血清；
6．標(biāo)準(zhǔn)抗原；
7、0.05mol/L pH7.2PBS液；
8、1％硼酸的PBS液。
三、操作方法
1、炭致敏
取濕炭粉0.25g（干粉0.10g），加入經(jīng)56℃～60℃滅活30min的稀釋高免血清3ml，充分搖勻，置37℃致敏30min，不時(shí)搖動(dòng)，取出后用pH 7.2 PBS液洗滌3次。zui后一次用含1％硼酸和1％兔血清的PBS液洗滌一次，離心去上清，再取此液3ml，混勻即可。同時(shí)以正常血清致敏的炭粒處理，以作對(duì)照。
致敏血清（加1/萬(wàn)硫柳汞防腐）于室溫或4℃冰箱中保存，一年內(nèi)有效。
2、取潔凈玻璃板一塊，以玻璃鉛筆劃成小格，加被檢標(biāo)本0.10ml，再加免疫炭血清0.05ml，充分混勻，靜止1min~5min，判定結(jié)果。
同時(shí)設(shè)三個(gè)對(duì)照：
（1）免疫炭血清+標(biāo)準(zhǔn)抗原；
（2）正常炭血清+標(biāo)準(zhǔn)抗原；
（3）正常炭血清加待檢抗原。
四、結(jié)果判定
在對(duì)照*成立的情況下，判定本試驗(yàn)結(jié)果：
“＋＋＋＋"：炭粉全部凝集，液體*清亮透明；
“＋＋＋"：炭粉大部分凝集，液體透明；
“＋＋"：炭粉一半凝集，液體較透明；
“＋"：炭粉微凝集，但與對(duì)照有差別，液體混濁；
“—"：炭粉不凝集，液體不透明；
炭凝以“＋＋"做為反應(yīng)滴度的終點(diǎn)。
