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木質(zhì)素(Lignin)含量試劑盒資料詳細

2016-9-27  閱讀(2322)

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木質(zhì)素(Lignin)含量試劑盒資料詳細分光光度法 50 管/48 樣 
注意:正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。 
測定意義 
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì),存在于木質(zhì)組織
中,主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間,起抗壓作
用。 
測定原理 
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙酰化后在 280nm 處有特征吸收峰,280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素
含量正相關(guān)。 
木質(zhì)素(Lignin)含量試劑盒資料詳細需自備的儀器和用品 
天平、40目篩,玻璃試管、燒杯、離心機,恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計、
1mL石英比色皿、高氯酸,濃硫酸。 
試劑組成和配制 
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。 
試劑二:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。 
試劑三:液體 100mL×1瓶,4℃保存。 
樣品處理 
樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過40 目篩,稱取約5mg(記為W)于10mL玻璃試管中(務(wù)
*玻璃試管,不可用Ep管) 
測定操作表 
計算公式 
標準曲線:y =1.0124x+0.2205,R2
=0.9889 
Lignin(mg/g干重)= (ΔA-0.2205)÷1.0124×V 反總×10-3
÷W×T=0.002×(ΔA-0.2205) ÷W×T 
V 反總:反應(yīng)總體積:2.04mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:稀釋倍數(shù) 
注意事項 
1. 試劑一有毒性,請操作時做好防護措施,加熱前必須用封口膜密封,以防氣體溢出。 
2. 加熱過程中有劇烈反應(yīng),震蕩時輕搖,以免壓力過大噴出造成人生傷害。 
3. 試劑三具有強刺激性,建議操作過程全部在通風櫥子操作。 
4. 取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙酰化程度,試劑三的用量可調(diào)整,保證吸光值在
  空白管  測定管 
樣本(mg)    5 
試劑一(μL)  1000  1000 
高氯酸(μL)  40  40 
于 10mL玻璃試管中,用封口膜密封,充分混勻,80℃水浴40min,每隔10min 震
蕩一次,然后自然冷卻 
試劑二(μL)  1000  1000 
充分混勻 
上清(μL)  10  10 
試劑三(μL)  1990(參照注意事項四)  1990(參照注意事項四) 
取1mL于石英比色皿,測定280nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A 空白管和A 測定管,
ΔA=A測定管-A 空白管 0.1-0.8之間即可,并在公式中參與計算。 

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