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注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。測定意義
硝態氮是植物zui主要的氮源。植物體內硝態氮含量反映了土壤中硝態氮的供應情況,可作為土壤氮肥的指標。測定植物體內的硝態氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營養情況,而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質也有重要的意義。
測定原理
在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應,生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12) 呈黃色,在一定范圍內,其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計算得硝態氮含量。
植物硝態氮自備實驗用品及儀器
蒸餾水、天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
試劑一:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前根據用量每瓶加 1mL 濃硫酸充分溶解。試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1 支,4℃保存。
樣本處理
按照質量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1mL 蒸餾水)加入蒸餾水,室溫勻漿后置于 90℃恒溫水浴鍋中浸提 30min,期間不斷晃動或者置于 90℃ 恒溫搖床中振蕩提取 30min,待冷卻后于 25℃,12000g 離心 15min,取上清待測。(深色植物勻漿后加入約 3mg 試劑三后再提取)
注意事項
1. 試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。
2. 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性,操作時需做好防護措施。
3. zui低檢出限為 62.8μg/g。
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