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木質素(Lignin)含量試劑盒說明書
For Research Use Only
僅供研究用
貨號:QYS-237008
分光光度法 50 管/48樣
齊一生物提供木質素測定及木質素單體檢測服務
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
木質素是構成植物細胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇構成的一類物質,存在于木質組壓作用。
測定原理
木質素中的酚羥基發生乙酰化后在 280nm 處有特征吸收峰,280nm 的吸光值高低與木質素含量正相關。
需自備的儀器和用品
天平、40 目篩,玻璃試管、燒杯、離心機,恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計、 1mL 石英比色皿、高氯酸,濃硫酸。
試劑組成和配制
試劑一:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。試劑二:液體 50mL×1 瓶,4℃保存。試劑三:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
樣品處理
樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩,稱取約 5mg(記為 W)于 10mL 玻璃試管中(務*玻璃試管,不可用 Ep 管)
計算公式
標準曲線:y =0.02776x+0.0068,R2=0.9889
Lignin(mg/g 干重)= (ΔA-0.0068)÷0.02776×V 反總×10-3÷W×T
=0.0735×(ΔA-0.0068) ÷W×T
V 反總:反應總體積:2.04mL;W:樣本質量,g;T:稀釋倍數
注意事項
- 試劑一有毒性,請操作時做好防護措施,加熱前必須用封口膜密封,以防氣體溢出。
- 加熱過程中有劇烈反應,震蕩時輕搖,以免壓力過大噴出造成人生傷害。
- 試劑三具有強刺激性,建議操作過程全部在通風櫥子操作。
- 取上清加試劑三步驟根據自己樣品乙酰化程度,試劑三的用量可調整,保證吸光值在
0.1-0.8 之間即可,并在公式中參與計算。
- 乙酰化測定木質素含量如受到實驗環境的影響,可自行制作標準曲線。