手推式脂質體擠出器的使用方法可分為以下步驟,結合操作要點與注意事項總結如下:
一、操作前準備
1、部件檢查與預處理
檢查O型圈是否磨損,如有需更換原裝零件,避免泄壓風險。
徹底清洗擠出器組件(如膜、微米孔板),建議用超聲波清洗并多次用純水預擠壓,確保通道通暢。
聚碳酸酯膜需移除藍色保護膜,僅保留白色膜片,安裝時用樣品浸潤以避免氣泡影響擠出效率。
2、樣品預處理
若脂質體混懸液含大顆粒或聚集物,建議先通過均質處理減小粒徑,避免堵塞濾膜。
確保樣品已均勻分散,減少沉淀風險。
二、操作步驟
1、組裝與裝樣
按“三明治結構”安裝濾膜組合(如聚碳酸酯膜+助濾膜)。
將預處理后的樣品裝入氣密性玻璃注射器,連接擠出器腔體,確保沿針口插到底后輕擰固定。
2、擠出操作
首次擠出:緩慢均勻推動注射器活塞,保持用力方向與注射器軸線一致,使樣品通過濾膜流向另一側空注射器。
多次擠出:完成后交換兩側注射器位置,重復推動以實現多次擠壓(通常需3-10次),直至達到粒徑均一度的要求。
控溫需求:若需恒溫操作,可將整套設備置于熱水浴中。
三、注意事項
1、操作規范
全程保持用力均勻,避免方向偏移導致注射器折斷或漏液。
注射器擰緊時僅需輕擰固定,過度用力可能損壞螺紋結構。
2、故障處理
漏液問題:優先檢查螺母是否擰緊;若仍漏液需重新組裝濾膜或更換密封件。
擠出困難:檢查濾膜是否堵塞,或確認未誤裝藍色保護膜。
四、優化建議
1、樣本量選擇:手推式擠出器適合微量樣品(0–1 mL),實驗初期建議小批量測試工藝參數。
2、膜孔徑選擇:根據目標粒徑選擇合適孔徑的徑跡蝕刻膜(如100 nm膜可獲得約100 nm粒徑的脂質體)。
3、記錄參數:記錄擠出次數、壓力變化及最終粒徑分布,便于工藝優化。
通過上述步驟,可高效完成脂質體的粒徑均一化制備,同時降低操作風險。
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