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徠創生物服務簡介

慢病毒具有廣泛的感染譜，可以有效感染分lie期和靜止期的細胞，并且能夠*穩定表達外源基因，因而成為導入外源基因的有力工具。現在慢病毒系統已經被廣泛應用到各種細胞系的基因過表達、基因干擾以及活體動物實驗中。

服務內容：慢病毒包裝的基因涉及常規的蛋白編碼基因及非編碼基因，比如：miRNA、lncRNA以及circularRNA等的過表達及干擾的慢病毒包裝服務。

慢病毒包裝服務價格與周期

服務編號	病毒滴度	規格	贈送陰性對照	價格	周期
LC1033	過表達慢病毒	過表達慢病毒，病毒滴度>10^8PFU/ml	1ml(>10^8PFU/ml)	詢價	6-8周
LC1034	干擾慢病毒	過表達慢病毒，病毒滴度>10^8PFU/ml	1ml(>10^8PFU/ml)	詢價	6-8周

慢病毒包裝服務實驗流程

a. 慢病毒過表達質粒載體的構建： 根據目的基因序列設計特異性擴增引物，采用高保真PCR技術從模板中調取目的基因CDS區連入核心載體。

b. 慢病毒干擾質粒載體的構建：合成目的基因的siRNA序列，退火成雙鏈，然后連入慢病毒干擾質粒載體。

c. 非編碼基因過載體構建：從模板中調取基因相應的miRNA前體, 然后連入慢病毒核心質粒（miRNA以基因組為模板，lncRNA和circularRNA根據需要可以用cDNA或基因組為模板）。

d. 慢病毒載體的包裝與濃縮純化： 核心質粒和輔助質粒進行高純度無內毒素抽提，共轉染293T細胞，轉染后8h 更換為*培養基，培養48和72h后，分別收集富含慢病毒顆粒的細胞上清，病毒上清液通過超離心濃縮病毒。

服務流程：

徠創客戶須知

1、適用于在難以轉染的細胞中進行的基因過表達或干擾研究，如原代神經細胞，干細胞，腫瘤細胞等；

2、適用于快速建立穩定表達的特定基因細胞株；

3、適用于In vivo 實驗，包括穩定表達細胞株成瘤實驗、局部注射、活體動物的基因過表達或干擾等。

徠創生物服務承諾

提供完整客觀準確的實驗報告。