一.
*,把內層鍋拿出來,第二,再向外層鍋內加入適量的水,使水面與三角架相平為宜。
不要忘記加水，同時水量不能加得太少，防止滅菌鍋燒干而引起爆炸事故。
二．
把內層鍋放進去，并且裝入待滅菌物品（內裝培養基或小的三角瓶），不要裝得太擠，以免妨礙汽流通影響滅菌效果，三角瓶口不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋溫包口的紙而透入棉塞。
三.
加上蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內層鍋的排氣槽內，再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個棉栓，使螺栓松緊一致，，勿使漏氣。用電爐或其他方法加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣，待冷空氣排盡后，關上排氣閥讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升，當鍋內達到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。
四.
停止加熱，待壓力表的壓力降至零位時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。
必須注意：當壓力不為零時，不能開蓋取物否則由于壓力突然下降，容器內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染而發生污染，甚至灼傷操作者。
五.
安全閥不能隨意調節，因為，安全閥是保障安全使用的重要部件。
