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使用胎牛血清的常見誤區有哪些?
使用胎牛血清時常見的誤區主要包括以下幾點:
?儲存條件不當?:
誤區:將血清長時間儲存在2-8℃環境中,或反復凍融。
正確做法:?血清應長期保存在-20℃以下?,避免反復凍融。若需頻繁使用,可在4℃下短期保存(不超過一個月),但應盡快用完并避免污染。
?解凍方法不正確?:
誤區:直接將血清從冷凍狀態置于室溫或高溫水浴中快速解凍。
正確做法:?推薦采用梯度融化方法?,先將血清置于4℃冰箱中融解,或在室溫下緩慢解凍,并規則地搖晃均勻。避免使用高溫水浴快速解凍,以減少沉淀的產生。
?處理絮狀沉淀不當?:
誤區:認為絮狀沉淀是有害的,必須過濾去除。
正確做法:?絮狀沉淀主要由纖維蛋白和脂蛋白組成,是正常現象,不影響血清質量?。可以通過離心(如400g,1-2分鐘)將沉淀沉至瓶底,然后小心地將上清液轉移到另一個無菌瓶中。大多數情況下,輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。不建議使用過濾方法去除沉淀,因為可能會堵塞濾膜?。
?未考慮血清的適用性?:
誤區:盲目選擇血清品牌,不考慮實驗的具體需求和細胞的適應性。
正確做法:?在選擇血清時,應考慮實驗的具體需求、細胞的生長特性和血清的來源、質量等因素?。可以先提取一部分細胞進行試用,按照比例替換血清,以觀察細胞的適應情況。
?忽視無菌操作?:
誤區:在儲存、解凍和使用血清過程中忽視無菌操作。
正確做法:?整個操作過程應在無菌操作臺中進行,注意無菌操作?,以避免污染。
?對血清滅活處理的理解不足?:
誤區:認為所有情況下都需要對血清進行滅活處理。
正確做法:?血清滅活不是強制要求,客戶可以自行選擇是否進行?。滅活條件為水浴溫度56℃,30分鐘。但需注意,滅活后的血清可能會出現沉淀變多的現象。溶液
通過避免這些常見誤區,可以更有效地利用胎牛血清進行細胞培養,提高實驗效果和數據準確性。
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