如何選擇正確的胎牛血清(FBS)?
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是細胞培養中常用的關鍵添加劑,正確選擇需綜合考慮以下因素:
1. 血清的來源與質量認證
產地:不同來源(如澳洲、南美、北美)的血清成分可能差異較大。
南美血清:價格較低,適合普通細胞系。
澳洲或新西蘭血清:監管嚴格,內毒素低,適合干細胞、原代細胞或敏感細胞。
國產血清:來源可靠批次穩定,價格比進口便宜質量有保障,目前國內做的比較好的SERANA品牌,尤其是AD級胎牛血清,為主打產品。
質量認證:
檢查是否通過 病毒檢測(如BVDV、支原體、噬菌體等)。
是否有 ISO 9001/13485認證 或 GMP級生產(對臨床前研究尤為重要)。
關注 內毒素水平(越低越好,通常需≤10 EU/mL)。
2. 血清的營養成分
總蛋白含量:一般在30-45 mg/mL之間,過高可能含過多雜質,過低可能營養不足。
關鍵生長因子:如IGF-1、EGF、FGF等,需根據細胞類型選擇(如神經細胞需要更高神經生長因子)。
球蛋白(IgG)含量:若進行免疫相關實驗(如疫苗生產),需低IgG或無IgG血清。
3. 適用性與批次測試
細胞類型匹配:
原代細胞或干細胞:需高等級血清(如:SERANA 胎牛血清/BUNSEN胎牛血清)
腫瘤細胞或常規細胞系:可選擇經濟型血清。(如:SERANA AD級胎牛血清、/BUNSEN胎牛血清)
批次測試:
購買前要求供應商提供 小樣,進行細胞增殖、貼壁率、克隆形成率等測試。
關注血清的 促生長能力 和 細胞形態維持效果。
4. 滅活處理
熱滅活(56℃, 30分鐘):
可滅活補體系統,減少免疫實驗干擾。
但會破壞部分生長因子,通常僅在特定實驗(如免疫學、干細胞分化)中需要。
非滅活血清:適用于大多數常規培養,保留更多活性成分。
5. 價格與供應鏈穩定性
避免低價陷阱:低價血清可能來源不明或質量不穩定。
選擇可靠供應商:品牌授權代理商渠道購買。
批量采購:同一實驗盡量使用同一批次血清,減少批次差異影響。
胎牛血清對細胞的用途
促進細胞增殖:
提供生長因子(如IGF、FGF)和激素,刺激細胞分裂。
營養支持:
含葡萄糖、氨基酸、維生素、微量元素等基礎營養物質。
保護細胞:
抗胰酶活性(保護細胞在傳代時免受損傷)。
緩沖pH波動,維持培養液穩定性。
貼壁與鋪展:
提供纖維連接蛋白(Fibronectin)、層粘連蛋白(Laminin)等,幫助貼壁依賴性細胞附著。
運輸脂類與激素:
白蛋白等結合蛋白協助疏水性分子(如膽固醇、激素)的運輸。
注意事項
潛在風險:
批次間差異可能影響實驗重復性。
存在未知成分(如外泌體、殘留抗體),可能干擾特定實驗。
替代方案:
無血清培養基:適合成分明確的實驗(如藥物篩選),但需額外添加生長因子。
合成血清替代物:如KnockOut™ SR,用于干細胞培養。
總結
選擇胎牛血清需結合細胞類型、實驗目的和質量要求。建議優先通過小樣測試驗證效果,并確保供應商提供完整質檢報告。對于關鍵實驗(如發表論文、藥物開發),推薦使用高規格血清以減少風險。
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