如何選擇合適的微孔酶標板進行ELISA實驗?
以下是關于ELISA實驗孔板選擇的詳細指南,綜合孔板類型、實驗需求和操作要點:
一、孔板類型與核心參數
孔數與體積適配性
96孔板:標準布局(8×12),單孔體積100-200μL,適合中小規模實驗。
384孔板:高密度布局(16×24),單孔體積25-50μL,適用于高通量篩選。
顏色選擇
透明板:常規ELISA檢測(如TMB顯色)。
白色板:化學發光實驗(增強信號反射)。
黑色板:熒光檢測(降低背景干擾)。
表面處理與結合力
高結合力板:適合小分子蛋白(<10kD),結合能力300-400ng IgG/cm²。
低結合力板:適合大分子蛋白(>20kD),減少非特異性反應。
二、實驗場景匹配
需求場景 推薦孔板 理由
常規ELISA檢測 96孔透明板 操作簡便,兼容手動或半自動設備
高通量藥物篩選 384孔透明板 節省試劑,適配自動化工作站
化學發光/熒光檢測 白色/黑色板 優化信號采集(白色增強發光,黑色降低熒光背景)
低豐度蛋白檢測 高結合力板 提高靈敏度,減少包被蛋白用量
三、操作注意事項
樣本處理
血清/血漿需離心去除顆粒(3000 rpm, 10分鐘)。
384孔板加樣需精確控制體積(推薦使用多通道移液器)。
封閉與洗滌
高結合力板需用蛋白封閉劑(如5% BSA)。
洗滌緩沖液含0.05% Tween-20以減少非特異性結合。
設備兼容性
384孔板需高靈敏度酶標儀(信號強度較低)。
四、特殊需求解決方案
多指標聯檢:選擇預包被多因子檢測板(需驗證交叉反應)。
細胞培養整合:透明底黑色壁板適合細胞內ELISA(兼顧熒光與細胞觀察)。
通過以上參數和場景匹配,可快速定位適合實驗目標的孔板類型。
注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師及供貨商。
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