用于 ELISA 檢測的樣品處理
在醫學檢測中,如何正確處理樣品直接影響檢測結果的準確性,尤其是 ELISA 檢測中不同樣品的處理方式各異,如何選擇?
在醫學研究中,酶聯免疫吸附試驗被廣泛用于檢測各種生物標志物。然而,不同的樣品類型需要不同的處理方法,以確保檢測結果的準確性。例如,采集的血液樣本需在室溫或低溫下靜置,隨后通過離心分離成血清或血漿。其中,血清是從血液中分離出來的無細胞成分,而血漿則含有纖維蛋白原和其他凝血因子。選擇正確的抗凝劑也很關鍵。此外,對于組織勻漿和細胞裂解物,需注意添加蛋白酶抑制劑以防止目標分析物降解。正確處理細胞培養上清液,則需要通過離心去除雜質。每一步操作都至關重要,直接關系到最終的檢測結果。因此,研究人員和醫療工作者在進行 ELISA 實驗前,天正信達詳細介紹并嚴格遵循相應的樣品處理指南,以確保實驗的成功和數據的可靠性。
以下是用于ELISA檢測的樣品處理規范及注意事項:
一、樣本類型及預處理方法
血清樣本?:
采集后室溫靜置30分鐘至2小時(或4℃過夜)使血液凝固
離心條件:2000-3000×g離心15-20分鐘
關鍵點:避免溶血,傾斜試管擴大血清分離面
血漿樣本?:
需使用EDTA/肝素抗凝管采集
采集后30分鐘內離心(700-1000×g,10-15分鐘)
注意:不可吸取中間白細胞層
細胞培養上清?:
直接離心(1000×g,20分鐘)去除細胞碎片
分泌性成分檢測需確保無菌收集
組織樣本?:
需用預冷PBS沖洗殘留血液(1:9重量體積比勻漿)
推薦加入蛋白酶抑制劑,超聲或凍融輔助裂解
二、保存條件規范
樣本類型 短期保存 長期保存 有效期
血清/血漿 4℃(1周內) -80℃分裝 1-6個月
細胞上清 4℃(24小時) -80℃分裝 1個月
組織勻漿 4℃(立即檢測) -80℃分裝 3個月
三、關鍵注意事項
干擾物控制?:
嚴禁使用含NaN3的防腐劑(會抑制HRP活性)
脂血/溶血樣本需額外離心處理
凍融要求?:
分裝保存避免反復凍融(≤3次)
復溶時需室溫平衡后輕柔混勻
濃度調整?:
預實驗確定稀釋倍數(建議2-500倍梯度)
OD值超標準曲線時應稀釋重測
四、特殊樣本處理
尿液/胸腹水?:需10000×g高速離心去除顆粒物
紅細胞裂解物?:用4倍體積超純水裂解后離心
食品樣本?:需均質化處理并去除脂肪層
注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或供應商。
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