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Elisa試劑盒檢測原理

2021-01-20標簽:檢測, 樣本, 標準

    Elisa生物檢測是一種敏感度高,同時特異性強,重復性好的實驗檢測方法,由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

    四種Elisa檢測方法由于其檢測原理各有優劣:

    優點缺點直接法1.操作簡便2.消除了二抗交叉反應1.一抗由于添加標簽免疫活性降低2.標記一抗耗時且昂貴3.沒有產生信號放大間接法1. 一抗的最大免疫反應性得以保留2. 高靈敏度,信號放大1. 二級抗體可能發生交叉反應,產生非特異性信號2. 需要額外的孵育步驟夾心法1.特異性,靈敏度高2.適合復雜的樣本1.檢測時間,反應時間增加2.步驟繁瑣競爭法1. 通過觀察預期信號輸出中的干擾來測量樣本中抗原(或抗體)的濃度。2. 最常用于分析物較小,不能同時跟兩種不同的抗體結合。1.計算不太直觀2.總體敏感性和特異性較低。

    Elisa試劑盒選擇原則:

    指標選項樣本類型人,小鼠,大鼠檢測指標的類別·多表位的大蛋白:夾心ELISA·小分子:競爭ELISA檢測需求定性或定量靈敏度低濃度的物質需選擇高靈敏度檢測方式樣本體積珍貴的樣本用少量的體積回收率和線性·靈敏度·動態范圍·標準曲線檢測系統比色法,熒光法,發光法其他優勢協議簡單,操作方便,實驗時間短

    Elisa試劑盒評價標準:

          ① 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,應大于等于0.9900。

          ② 靈敏度:反應試劑盒的最低檢測濃度

          ③ 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

          ④ 重復性:板內、板間變異系數

          ⑤ 回收率:判斷實驗的準確性和特異性

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