從樣本到結(jié)果：豬瘟PCR抗體檢測(cè)儀的操作流程@2024全國(guó)包郵BK-PCR16D，山東博科儀器廠家持續(xù)更新中，非洲豬瘟(African Swine Fever, ASF)是一種對(duì)生豬養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重威脅的病毒性疾病。為有效防控非洲豬瘟，快速且準(zhǔn)確的診斷是關(guān)鍵。PCR抗體檢測(cè)儀通過(guò)檢測(cè)豬血清中的非洲豬瘟病毒抗體，能夠在短時(shí)間內(nèi)提供診斷結(jié)果。以下是從樣本采集到結(jié)果報(bào)告的操作流程：

　　操作流程

　　樣本采集

　　樣本類型：通常采集疑似感染豬的血清樣本。

　　采集方法：使用無(wú)菌注射器從豬的耳靜脈或前腔靜脈采集血液，血液在室溫下靜置1-2小時(shí)，待血清自然析出后，使用無(wú)菌技術(shù)分離血清。

　　樣本標(biāo)記：確保樣本標(biāo)識(shí)清晰，包括豬只編號(hào)、采集日期和采集人員等信息。

　　樣本運(yùn)輸與保存

　　運(yùn)輸條件：樣本應(yīng)置于冷藏條件下(2-8℃)運(yùn)輸，以保持其穩(wěn)定性。

　　保存條件：若無(wú)法立即檢測(cè)，血清樣本可在-20℃或-70℃低溫冰箱中保存，避免反復(fù)凍融。

　　樣本處理

　　試劑準(zhǔn)備：按照PCR抗體檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書，準(zhǔn)備所需的試劑，包括抗原包被板、標(biāo)記抗體、底物等。

　　樣本稀釋：根據(jù)試劑盒說(shuō)明，將血清樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋，通常為1:10或1:100。

　　加樣

　　加樣操作：將稀釋后的血清樣本加入預(yù)包被有非洲豬瘟病毒抗原的微孔板中，每孔加入50-100µL樣本。

　　溫育：將加樣后的微孔板置于恒溫振蕩器中，37℃溫育1小時(shí)，使抗體與抗原充分結(jié)合。

　　洗滌

　　洗滌步驟：使用洗滌緩沖液清洗微孔板3-5次，去除未結(jié)合的抗體和雜質(zhì)。

　　加標(biāo)記抗體

　　標(biāo)記抗體：向微孔板中加入標(biāo)記有熒光素的抗豬IgG抗體，37℃溫育30-60分鐘。

　　再次洗滌

　　洗滌步驟：再次使用洗滌緩沖液清洗微孔板，去除未結(jié)合的標(biāo)記抗體。

　　加底物

　　底物：向微孔板中加入底物溶液(如TMB或OPD)，37℃避光溫育10-15分鐘，使結(jié)合的標(biāo)記抗體顯色。

　　終止反應(yīng)

　　終止液：加入終止液(如硫酸)終止反應(yīng)，使顯色停止。

　　結(jié)果讀取

　　儀器讀?。菏褂脽晒舛縋CR檢測(cè)儀讀取熒光信號(hào)，儀器自動(dòng)生成吸光度或熒光強(qiáng)度值。

　　結(jié)果分析

　　閾值判斷：設(shè)定閾值，根據(jù)樣本吸光度或熒光強(qiáng)度值與閾值的比較，判斷樣本是否為陽(yáng)性。

　　結(jié)果報(bào)告：生成檢測(cè)報(bào)告，注明樣本編號(hào)、檢測(cè)結(jié)果(陽(yáng)性或陰性)、檢測(cè)人員和檢測(cè)日期等信息。

　　注意事項(xiàng)

　　無(wú)菌操作：整個(gè)操作過(guò)程需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，避免污染。

　　試劑保存：試劑需在z定條件下保存，使用前檢查有效期。

　　儀器校準(zhǔn)：定期校準(zhǔn)熒光定量PCR檢測(cè)儀，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　通過(guò)以上操作流程，PCR抗體檢測(cè)儀能夠高效、準(zhǔn)確地檢測(cè)非洲豬瘟病毒抗體，為非洲豬瘟的防控提供科學(xué)依據(jù)。