一、簡介
PCR是聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction)的簡稱，是在短時間內體外大量擴增特定的DNA段的分子生物學技術。自動完成聚合酶鏈反應，提供DNA 擴增的溫度條件而設計的儀器稱為PCR儀。
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二、 PCR儀溫度校準的項目及必要性
一個穩定的溫度循環是成功實現PCR所必需的。其中溫度控制的動、穩態特性是影響PCR擴增結果正確與否的重要因素之一, 這包括溫度準確性、升降溫速度、溫場均勻性、max超調溫度。
（一）、溫度準確性
溫度準確性是PCR儀重要的性能指標，如溫度準確性低可直接造成非特異性擴增，甚至是錯誤的擴增結果，造成假陽性和假陰性。
市場上各家廠商考核基因擴增儀（PCR儀）性能的主要指標，一般廠家的企業指標為±0.5℃，一些性能較好的產品可以實現的溫度準確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準確度進行測試。
校準實驗平均溫度的計算公式為：I—參加檢測的溫度探頭序號；n—參加檢測的溫度探頭的數量
（二）、溫場均勻性
由于PCR儀加熱器加熱不均勻，導致PCR儀模塊上各孔存在一定溫差。造成試驗結果偏差。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區域，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標。一般廠家的企業指標規定均勻性為±0.5℃，一些性能較好的產品可以實現的溫度均勻度為±0.3℃。
校準實驗時，通過選取孔板中16個特殊反應位置來測量溫度，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值。均勻度計算公式為：tmax-tmin
（三）、升降溫速率
PCR擴增產物數量的多少決定了PCR的效率。為了在短時間內獲得盡可能多的產物，需要儀器在升降溫段具有按照預設升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達15~20℃）。一個完整的PCR過程，是由若干個升溫→恒溫→降溫循環構成的。因為“變性”，“退火”和“延伸”3個階段是必須要保證的。因此，只有使升降溫的過程盡可能地迅速，才能縮短每個PCR循環以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業指標規定升溫速率為±3℃/sec。
儀器校準實驗時，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間。
（四）、max-超調溫度
當溫度從一定點溫度調節到另一定點溫度,就會產生溫度的超調。超調溫度過大同樣會對試驗產生影響，所以校準實驗時，需要計算max-超調溫度和平均超調溫度。
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三、解決方案
根據基因擴增儀(PCR儀)測溫系統校準規范溫度校準系統，依據<YYT1173-2021聚合酶鏈反應分析儀> 行業標準，*符合《JJF 1527-2015 聚合酶鏈反應分析儀校準規范》的要求，我們公司推出了PCRCAL來校準pcr儀。
具體方案 產品包括ZCPCRCAL-96W、ZCPCRCAL-96S、ZCPCRCAL-48S、ZCPCRCAL-32S。4種型號，可滿足大多數 24孔，48孔，96孔的PCR儀的計量校準需求。、
系統采用高精度多路測溫儀，高精度/高靈敏度的熱敏電阻探頭，采用加工工藝，保證探頭與孔間的充分接觸，應用專業的溫度驗證系統軟件，實現校準自動化，自動保存原始記錄，自動生成校準報告。校準過程中，系統軟件實時記錄數據，并生成趨勢圖；系統自動計算校準結果所需要的溫度示值誤差、溫度均勻性，升降溫速率等參數。
為保證系統的測量精度實現系統傳感器溫度的標定，可使用PCR儀溫度驗證系統軟件 配合我公司提供的ZCTB系列高精度恒溫槽，校準等溫塊，高精度多路測溫儀，二等標準溫度計等裝置對驗證探頭進行校準。
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