pcr儀溫度校準裝置、基因擴增儀校驗裝置　

背景

　　如今PCR基因擴增技術已經成為分子生物學領域的常用技術之一，被廣泛運用于基礎研究及臨床診斷等領域。根據基因擴增技術的原理可得出，溫度的控制對PCR實驗技術的影響是關鍵性的，市面上眾多品牌型號的PCR基因擴增儀在溫控技術和制造工藝上都有著非常大的差異，因此亟需建立一套統一的質量控制體系來規范PCR儀的使用和生產。

　　PCR儀溫度校準裝置 基因擴增儀校準儀 pcr儀校準裝置 pcr溫度校驗儀

一、產品概述

　　基因擴增儀/PCR儀溫度驗證裝置的用途是對基因擴增儀的溫度控制環節進行驗證和校準，常規基因擴增儀的溫度控制范圍在0到120攝氏度，測溫max允許示值誤差通常為±0.3-1.0攝氏度，根據《JJF 1527-2015 聚合酶鏈反應分析儀校準規范》的要求，溫度校準設備測量不確定度應≤0.1攝氏度，且需要通過計量檢定。現今的基因擴增儀根據功能可以分為普通、梯度和熒光定量PCR儀，根據基因擴增儀的溫度測試環境，我司開發的這套系統能滿足市面上大部分PCR儀的工作環境。

二、 PCR儀溫度校準的項目及必要性

　　一個穩定的溫度循環是成功實現PCR所必需的。其中溫度控制的動、穩態特性是影響PCR擴增結果正確與否的重要因素之一, 這包括溫度準確性、升降溫速度、溫場均勻性、max超調溫度。

　　（一）、溫度準確性

　　溫度準確性是PCR儀重要的性能指標，如溫度準確性低可直接造成非特異性擴增，甚至是錯誤的擴增結果，造成假陽性和假陰性。

　　市場上各家廠商考核基因擴增儀（PCR儀）性能的主要指標，一般廠家的企業指標為±0.5℃，一些性能較好的產品可以實現的溫度準確度為±0.3℃。故需對PCR儀控溫準確度進行測試。

　　校準實驗平均溫度的計算公式為：I—參加檢測的溫度探頭序號；n—參加檢測的溫度探頭的數量

　　（二）、溫場均勻性

　　由于PCR儀加熱器加熱不均勻，導致PCR儀模塊上各孔存在一定溫差。造成試驗結果偏差。一般PCR儀邊緣點的溫度低于中間區域，所以均勻性為PCR儀重要的性能指標。一般廠家的企業指標規定均勻性為±0.5℃，一些性能較好的產品可以實現的溫度均勻度為±0.3℃。

　　校準實驗時，通過選取孔板中16個特殊反應位置來測量溫度，并得出孔板的溫度均勻性。均勻性為各個探頭在同一時刻max溫度與min 溫度的差值。均勻度計算公式為：tmax-tmin

　　（三）、升降溫速率

　　PCR擴增產物數量的多少決定了PCR的效率。為了在短時間內獲得盡可能多的產物，需要儀器在升降溫段具有按照預設升降溫速率快速升溫和降溫的能力（max-升溫速率達15~20℃）。一個完整的PCR過程，是由若干個升溫→恒溫→降溫循環構成的。因為“變性”，“退火”和“延伸”3個階段是必須要保證的。因此，只有使升降溫的過程盡可能地迅速，才能縮短每個PCR循環以及整個PCR 過程所需時間。一般廠家的企業指標規定升溫速率為±3℃/sec。

　　儀器校準實驗時，升溫速率為溫度從40℃到90℃的時間；降溫速率為溫度從70℃到35℃的時間。

　　（四）、max-超調溫度

　　當溫度從一定點溫度調節到另一定點溫度,就會產生溫度的超調。超調溫度過大同樣會對試驗產生影響，所以校準實驗時，需要計算max-超調溫度和平均超調溫度。

　　三、解決方案

　　根據基因擴增儀(PCR儀)測溫系統校準規范的要求

　　具體方案 產品可滿足大多數 24孔，48孔，96孔的PCR儀的計量校準需求。系統采用有線、無線高靈敏度的熱敏電阻探頭，采用精密加工工藝，保證探頭與孔間的充分接觸，溫度驗證系統軟件，實現校準自動化，自動保存原始記錄，自動生成校準報告。校準過程中，系統軟件實時記錄數據，并生成趨勢圖；系統自動計算校準結果所需要的溫度示值誤差、溫度均勻性，升降溫速率等參數。

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